Résumé du document Lors de ce travail pratique, nous allons extraire la caféine du thé puis réaliser son spectre infrarouge et mesurer son point de fusion. Nous allons ensuite réaliser un dosage sur différents "Coca-Cola" commerciaux afin de comparer avec les informations sur l'étiquette. Afin de réaliser ce dosage, nous allons construire une courbe d'étalonnage à partir de solution de caféine de concentration connue. En premier lieu, nous avons réalisé l'extraction de la caféine du thé. Pour réaliser cette extraction, nous introduisons 20g de thé et 20g de bicarbonate de calcium dans 250 ml d'eau distillée dans un ballon rodé. Le bicarbonate de calcium permet de neutraliser l'acidité. En effet dans les feuilles de thé, il y a des acides de tanins solubles dans l'eau. Le carbonate permet d'éliminer l'acide. La caféine n'est donc plus soluble dans l'eau. Dosage de la caffeine par etalonnage en. L'extraction au dichlorométhane dans lequel la caféine à une solubilité modérée permet la séparation de la caféine des impuretés solubles.
Effectuer un test de répétabilité validé en dessous de 0, 5% et remplir le tableau ci-dessous. tR / min Essais Etalon interne Caféine 2 Test de répétabilité O/N Aiétalon 3 Valeurs gardées: tR / min%Aiétalon h iétalon ρiétalon / mg. L-1 2/6 3. Préparation de la fiole de dosage (FFEI) et injection Dans une fiole de 20 mL, introduire le volume adapté (de l'ordre de 30 µL, mesuré exactement) de solution mère (FM) ainsi que 150 µL de la solution de l'étalon interne (FEI). Compléter à 20 mL avec l'éluant. La solution ainsi préparée est appelée solution fille FFEI. Etalon interne utilisé: interne dans (FEI): Injecter en CLHP la solution fille FFEI. Remplir le tableau ci-dessous. Composé%Aiétalon ρi / mg. L-1 Q4. Montrer que: ρcaféine = ρétalon caféine ×%Aétalon%Acaféine étalon interne × étalon%Acaféine%Aétalon interne Q5. En déduire la concentration de la caféine dans la fiole mère FM puis dans le Coca-cola. Dosage de la caffeine par etalonnage de la. En déduire la masse de caféine extraite du Coca-cola. Q6. Comparer les résultats obtenus par les deux méthodes.
4. Influence de paramètres de la chaîne de CLHP Sur le mélange de votre choix, injecter en changeant: 1. le débit, 2. la température, 3. la proportion d'éluant. Remplir le tableau suivant. Mélange choisi: Essai Débit / t / °C% AcCN tr / min A h Nth R As 4 Q7. Conclure l'influence de chacun des paramètres. Q8. Expliquer l'intérêt de s'intéresser à Nth, R et As. 3/6 Feuille de résultats NOMS: Q1. Signification de chacun des termes Gemini C18 150*4, 6 5 µm mode isocratique boucle d'injection acétonitrile – eau, 70/30 (V/V) Détecteur à barrette de diodes Q2. Domaine de linéarité Protocole de dilution Validé Non validé Aptitude à la maîtrise d'une pipette automatique FG6 50 caféine / mg. Dosage par étalonnage externe - Chromatographie. L-1 Courbes d'étalonnages Acaféine = a caféine + b a= b= r² = hcaféine = c caféine + d c= d= 4/6 Q3. caféine (FF) = caféine (FM) = mg. L-1 caféine (Coca-cola) = Caféine%Aiétalon interne dans (FEI):%Aiétalon Composé Q4. Q5. caféine (FF) = 5/6 Q6. Q5. Conclusion sur l'influence de: débit: température: proportion d'éluant: Nth: R: As: 6/6