Si c'est négatif la surface reste incolore. -La dégradation du L-tryptophane par les bactéries appelées « TDA+ » (pour Tryptophane désaminase) entraîne la production d'acide indole-pyruvique, qu'on détecte par une goutte de réactif TDA: si positif, cela entraîne une coloration marron. Mode opératoire: -mettre environ 1mL de milieu urée-indole dans un tube stérile. - Mettre plusieurs colonies dans le tube (bien charger). - Incuber 2 heures à 37°C. 2 heures Urease + (couleur rouge) 2 heures AVANT APRES Ajouter 4 à 5 gouttes de Kovacs ou réactif de James Indole+ (anneau rouge en surface) AVANT APRES DISQUES D'ONPG (Biomerieux 55601) Explication: Les disques d'ONPG servent à détecter les germes fermentant le lactose. Test à l oxidase . La fermentation du lactose est un test important pour l'identification bactérienne. Les bactéries fermentant le lactose possèdent une enzyme appelée la b -Galactosidase: elle hydrolyse le lactose en galactose + dextrose. La b -Galactosidase peut également hydrolyser un autre substrat, l'ONPG (pour orthonitrophenyl- b -D-Galactopyranoside).
Les bactéries et les levures cultivées sur des milieux contenant de fortes concentrations de glucose montrent une activité oxydase inhibée, il est donc recommandé de tester les colonies cultivées sur des milieux sans excès de sucre, telles que la gélose nutritive., La gélose de soja tryptique est également un excellent milieu. les Bactéries cultivées sur des milieux contenant des colorants peuvent donner des résultats aberrants. Les réactifs d'essai tueront efficacement les micro-organismes, de sorte que la sous-culture doit être effectuée avant d'ajouter un réactif à une culture active. Le test d'oxydase peut être utilisé dans l'identification présumée de Neisseria et dans la différenciation et l'identification des bacilles à gram négatif. Test D'Oxydase-Principe, Utilisations, Procédure, Types, Interprétation Des Résultats... | Yakaranda. Les organismes à oxydase positive doivent être examinés par coloration de gram pour déterminer la morphologie et la réaction de gram., Des tests biochimiques supplémentaires sont recommandés pour une identification complète. L'utilisation d'un nichrome ou d'une autre boucle contenant du fer peut entraîner des réactions faussement positives.
La lecture des résultats se font à l'aide de vapeur de lugol: On met du lugol dans boite en verre, ensuite mètre cette dernière sur la flamme jusqu'à ébullition de lugol et avoir de vapeur, à ce moment on dépose notre boite de LPAA de façon que la vapeur passe directement sur le milieu. Résultat positive la boite se colore en bleu et la bactérie qui a dégradé l'amidon est entourée d'un cercle transparent. 1. Teste d'hypersensibilité au tabac: 2. IV. Teste d'hypersensibilité du tabac Le test d'hypersensibilité du tabac met en évidence le pouvoir pathogène d'une bactérie suite au dessèchement des zones d'inoculation sur les feuilles de tabac. Préparer une suspension bactérienne d'Erwinia de l'ordre de 10 9 ufc/ml d'une culture jeune (24h à 48h). Utiliser un plant de tabac ayant atteint le stade de 5 à 6 feuilles. À l'aide d'une seringue tuberculine de 1 ml, injecter la suspension bactérienne dans l'espace intercellulaire le long de la nervure centrale ou de la nervure secondaire. Figure 22: L'exposition de souche àLa vapeur de lugol (personnelle., 2016) Figure 23: L'aspect del'activité L'inoculation de la suspension bactérienne se fait sur la surface inférieure de la feuille.